Електрофореза је лабораторијска техника која се изводи са циљем раздвајања молекула према њиховој величини и електричном набоју, тако да се може поставити дијагноза болести, потврдити експресија протеина или идентификовати микроорганизми.
Електрофореза је једноставан и јефтин поступак који се користи у лабораторијским рутинама и у истраживачким пројектима. У складу са сврхом електрофорезе, можда ће бити потребно спровести друге тестове и прегледе како би се, на пример, дошло до дијагнозе.
За шта је то
Електрофореза се може изводити у више сврха, како у истраживачким пројектима, тако и у дијагнози, јер је то једноставна и јефтина техника. Тако се електрофореза може извршити да би се:
- Идентификујте вирусе, гљивице, бактерије и паразите, с тим што је ова примена чешћа у истраживачким пројектима;
- Тест очинства;
- Проверити експресију протеина;
- Идентификујте мутације, на пример, корисне у дијагнози леукемије;
- Анализирајте врсте хемоглобина у циркулацији, што је корисно у дијагнози анемије српастих ћелија;
- Процените количину протеина присутних у крви.
У складу са сврхом електрофорезе, можда ће бити потребно спровести друге комплементарне тестове да би лекар довршио дијагнозу.
Како се то ради
За електрофорезу потребан је гел, који може бити полиакриламид или агароза, у зависности од циља, пуфер за електрофорезу и бачва, маркер молекуларне тежине и флуоресцентна боја, поред опреме за УВ или ЛЕД осветљење, такође познате као трансиллуминатор.
Након припреме гела, мора се поставити одређени предмет да би се направили бунарићи у гелу, популарно звани чешаљ, и пустили да се гел стегне. Када је гел спреман, само нанесите супстанце на јажице. Због тога се у једну јажицу мора ставити маркер молекуларне тежине, позитивна контрола, која је супстанца за коју се зна шта је, негативна контрола, која гарантује валидност реакције, и узорци који се анализирају. Сви узорци морају бити помешани са флуоресцентном бојом, јер је на овај начин могуће визуализовати траке на трансиллуминатору.
Гел са узорцима мора се ставити у посуду за електрофорезу која садржи одређени пуферски раствор, а затим се уређај укључује тако да постоји електрична струја и, сходно томе, разлика потенцијала, што је важно за одвајање честица према њиховом оптерећењу и величини. Време рада електрофоретског флуида варира у зависности од сврхе поступка и може трајати до 1 сат.
После одређеног времена, могуће је видети резултат електрофоретског проласка кроз трансиллуминатор. Када се гел стави под УВ или ЛЕД светлост, могуће је визуализовати тракасти узорак: што је већи молекул, то се мање мигрира, приближавајући се бунару, док је светлији молекул, већи је миграциони потенцијал.
Да би се реакција потврдила, неопходно је да се визуализују опсези позитивне контроле и да се у негативној контроли ништа не визуализује, иначе је индикативно да је дошло до контаминације и цео поступак се мора поновити.
Врсте електрофорезе
Електрофореза се може изводити у различите сврхе и према њеној намени може се користити неколико врста гела, а најчешћи су полиакриламид и агароза.
Електрофореза за идентификацију микроорганизама чешће се изводи у истраживачким лабораторијама, међутим, у дијагностичке сврхе електрофореза се може користити за идентификацију хематолошких болести и болести које еволуирају са повећањем количине протеина, као главне врсте електрофорезе:
1. Електрофореза хемоглобина
Електрофореза хемоглобина је лабораторијска техника која се изводи ради идентификације различитих врста хемоглобина који циркулишу у крви, што омогућава идентификовање присуства болести повезаних са синтезом хемоглобина. Тип хемоглобина се идентификује електрофорезом при одређеном пХ, идеално између 8,0 и 9,0, са верификованим узорком трака који се може упоредити са нормалним узорком, омогућавајући идентификацију присуства абнормалних хемоглобина.
За шта се то ради: Електрофореза хемоглобина се ради за истраживање и дијагностиковање болести повезаних са синтезом хемоглобина, као што су анемија српастих ћелија и болест хемоглобина Ц, поред тога што је корисна у разликовању таласемије. Научите како да тумачите електрофорезу хемоглобина.
2. Електрофореза протеина
Електрофореза протеина је преглед који лекар захтева да би проценио количину протеина који циркулишу у крви и, самим тим, утврдио болести. Овај тест се ради на узорку крви који се центрифугира да би се добила плазма, део крви који, између осталих супстанци, чине протеини.
Након електрофорезе, може се визуализовати образац трака и, после тога, графикон на коме је назначена количина сваке фракције протеина, што је основно за дијагнозу.
За шта се то ради: Електрофореза протеина омогућава лекару да истражи појаву мултиплог мијелома, дехидратације, цирозе, упале, болести јетре, панкреатитиса, лупуса и хипертензије према обрасцу трака и графикону представљеном у извештају о прегледу.
Разумети како се то ради и како разумети резултат електрофорезе протеина.
Да ли је ова информација била корисна?
да не
Ваше мишљење је важно! Напишите овде како можемо побољшати свој текст:
Неко питање? Кликните овде да бисте добили одговор.
Е-адреса на коју желите да добијете одговор:
Проверите потврду коју смо вам послали.
Твоје име:
Разлог посете:
--- Изаберите разлог --- БолестЖиве бољеПомозите другој особиСтајите знање
Да ли сте здравствени радник?
НоПхисицианПхармацеутицалНурсеНутритионистБиомедицалПхисиотхерапистБеаутицианОтхер
Библиографија
- БИОСФЕРА ЕНЦИКЛОПЕДИЈЕ, ПОЗНАЈУЋИ НАУЧНИ ЦЕНТАР. Електрофореза: концепти и примена. 2015. Доступно на :. Приступљено 24. септембра 2019
- КАСВИ. Шта је електрофореза и зашто је важна?. Може се наћи у: . Приступљено 24. септембра 2019
